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血液中血清蛋白及其他球蛋白的分离原理

2020-06-08      105

实验原理

带电质点在电场作用下,带正电荷的移向负极,带负电荷的移向正极,这种现象称为电泳。蛋白质分子具有许多可解离的酸性基团和碱性基团,在一定的pH条件下,它会解离而带电,在某一pH下,蛋白质分子中所带的正电荷数恰好等于负电荷数,即分子静电荷等于零。此时蛋白质分子在电场中不移动,溶液的这一PH值称为该蛋白质的等电点。

 

当溶液的pH小于该蛋白质的等电点,则蛋白质分子会结合一部分H离子而带正电荷,在电场中就会向负极移,反之,如果溶液的pH大于该蛋白质的等电点,则蛋白质分子会解离出一部分H离子而带负电荷,在电场中就会向正极移动。

 

由于各蛋白质的等电点不同,在相同的pH溶液中所带的电荷性质不同,电荷的数目不同,因而在电场中泳动的方向和速度也不相同,从而使混合样品中的蛋白质各组分得到分离。

 

本实验采用的醋酸纤维薄膜电泳是以醋酸纤维薄膜为支持物。醋酸纤维薄膜对蛋白质样品吸附极少而无“拖尾”现象。

 

本方法快速省时、灵敏度高、样品用量少、操作简单,目前已广泛用于分析检测血浆蛋白、脂蛋白、糖蛋白、胎儿甲种球蛋白、体液、脊髓液、脱氢酶、多肽、核酸及其他生物大分子,为心血管病,肝硬化及某些癌症鉴别诊断提供了可靠的依据,因而已成为医学和临床检验的常规技术。

 

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