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膳食纤维的测定-标准方法

发布时间:2016-07-06 点击次数:2601

膳食纤维的测定-标准方法

 

一、实验原理

  膳食纤维又称为植物细胞壁,它包括纤维素、半纤维素、木质素、果胶、角质和二氧化硅等。本实验用中性洗涤纤维测定法测定,该法所测的膳食纤维为不被人消化系统中的酶所消化,也不被中性洗涤剂溶解的组分。其原理是样品经热的中性洗涤剂浸煮后,残渣用热的蒸馏水充分洗涤,除去样品中游离淀粉、蛋白质、矿物质,然后加入α淀粉酶溶液以水解结合态的淀粉,再用蒸馏水,丙酮依次洗涤,以除去残存的脂肪、色素等,残渣经烘干,即为不溶性膳食纤维。

二、实验用品

(一)器材

 (1)电热恒温干燥箱。

 (2)恒温箱。

 (3)可调温的电炉或可控温的电热板。

 (4)抽滤装置(包括抽滤瓶及水泵或真空泵)。

 (5)干燥器(用无水氯化钙或变色硅胶为干燥剂)。

 (6)高型烧杯(容量600ml)。

 (7)坩埚式耐热玻璃滤器(容量为60ml,孔径40~60µm;相当于250目~400目)。

 (8)耐热玻璃棉。

(二)试剂

 (1)石油醚(沸点范围35~60)。

 (2)中性洗涤剂溶液

    ?18.61g乙二胺四乙酸二钠和6.81g四硼酸钠(Na2B4O7.10H2O)用250ml蒸馏水加热溶解;

    30g十二烷基硫酸钠和10ml乙二醇独Diethyl Ether(2-ethoxy-ethanol)溶于200ml热蒸馏水中;

    ƒ4.56g Na2HPO4溶于150ml蒸馏水,将?ƒ3种溶液合并。然后用磷酸调节混合液pH至 6.9~7.1,zui后加蒸馏水至1000ml,即为中性洗涤溶液。此溶液使用期间如有沉淀生成,需在使用前加热到60,使沉淀溶解。

 (3)十氢萘。

 (4)α淀粉酶溶液:取0.1mol/LNa2HPO4溶液610ml和0.1mol/L Na2HPO4溶液390ml混匀,配成pH7.0的磷酸盐缓冲液。用此缓冲溶液配2.5%酶溶液,离心或过滤,取清液备用

(5)丙酮。

(6)无水亚硫酸钠。

(三)材料

     小麦麸皮。

三、实验程序

   1、样品处理

      将烘干样品磨细过20~30筛。准确称取0.500~1.000g置于高型烧杯中。

   2. 加试剂

     依次加入以下试剂于高型烧杯中:

     ???n中性洗涤剂溶液100ml(室温)

     n十氢萘2ml(样品煮沸时如产生的泡沫不多,则可不加此试剂)。

     n无水亚硫酸钠0.5g。

3.热处理

 将上述烧杯置于电炉上加热,使杯内溶液在5~10min内煮沸,自沸腾计时,维持微沸60min。

4.洗涤

      将烧杯内的内容物移入已称重之耐热玻璃滤器(内铺有耐热玻璃棉,并已于110烤箱烘至恒重内,抽滤至干,再加入热蒸馏水(100)约100ml洗残渣,重复洗3次(用热蒸馏水量约为 300~500ml)。

5. 酶处理

       加酶溶液约50ml于滤器中(滤器底部须加塞子,使之不漏溶液),使酶液浸没残渣,并加数滴甲苯以防腐,然后于恒温箱37放置18h或过一整夜。

6.洗涤

      取出滤器,除去底部的塞子,抽滤,并用热水约500ml分次洗去酶液。用碘液检查是否有淀粉残留,如淀粉已除尽,则可抽干滤液,然后加丙酮洗残渣,抽干,再以丙酮洗一次。若有淀粉残留,需重复“酶处理”步骤。

7. 将残渣及滤器于烘箱中110烘至恒重,每次称重时应先移入干燥器中,冷至室温后称量。

8.结果处理

      按下式计算样品中膳食纤维含量:

膳食纤维(含灰分)=

(滤器+残渣)的重量-滤器重量

×100%

样品重量

       

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